中國研究型醫院學會血栓與止血專委會通信作者：周洲，Email：fwcomd@126.com；宋鑒清，Email：songlisw@yeah.net【摘要】活化部分凝血活酶時間（APTT）延長混合血漿糾正試驗用于鑒別凝血篩選試驗中APTT延長的原因——凝血因子缺乏或存在凝血抑制物。該試驗有助于醫生結合患者臨床表現初步判斷患者APTT延長異常的原因，以及針對性選擇下一步實驗室檢查項目，所以是有重要價值的凝血試驗。目前，因該試驗的操作流程及結果解讀暫無統一標準，實驗室應用較為混亂，結果缺乏可比性，也限制了其應用和普及。本共識參考國內外相關文獻，結合出凝血檢驗領域專家的實踐經驗，致力于推進APTT延長混合血漿糾正試驗的標準化。【關鍵詞】活化部分凝血活酶時間；混合血漿糾正試驗；凝血因子；血友病ChineseexpertconsensusonoperationprocedureandresultinterpretationofAPTTmixingtestChineseSocietyonThrombosisandHemostasisCorrespondingauthor:ZhouZhou,Email:fwcomd@126.com;SongJianqing,Email:songlisw@yeah.net【Abstract】Activatedpartialthromboplastintime(APTT)mixingtestisusedtoinvestigatewhetherthecauseofprolongedAPTTiscoagulationfactordeficiencyorexistingcoagulationinhibitor.CombinationofthistestandclinicalmanifestationofpatientcanhelpclinicianstopreliminarilyjudgethereasonofprolongedAPTT,andselecttargetedfurthertests,henceit′savaluablecoagulationscreeningtest.SincetherearenostandardsaboutoperationprocedureandresultinterpretationofAPTTmixingtestyet,itsclinicalapplicationisabitconfusingandpopularityhasalsobeenhinderedduetothepoorcomparability.Thisconsensuscontainedreferencestothereleventdomesticandforeignliteratures,andpracticalexperiencesofthelaboratoryexpertsinthrombosisandhaemostasisfield,thusaimstopromotethestandardizationofAPTTmixingtest.【Keywords】Activatedpartialthromboplastintime;Mixingtest;Coagulationfactor;Hemophilia
活化部分凝血活酶時間（activatedpartialthromboplastintime，APTT）是醫療機構采用的出凝血功能篩選試驗，APTT延長常見的原因包括凝血因子缺乏、存在狼瘡抗凝物（lupusanticoagulant，LA）或凝血因子抑制物等。明確診斷需檢測凝血因子水平，稀釋蝰蛇毒凝血時間試驗和硅凝固時間檢測LA，改良的Nijmegen方法檢測凝血因子抑制物。APTT延長混合血漿糾正試驗（以下簡稱APTT糾正試驗）是將患者血漿（patientplasma，PP）與正常混合血漿（NormalPooledPlasma，NPP）按照一定比例混合后多次檢測APTT，評估混合血漿APTT“糾正”的程度，為確診試驗的選擇提供指導。目前APTT糾正試驗的檢測時機、操作流程和結果解讀方法眾多，暫無統一標準，報告模式較為混亂，限制·指南與共識·DOI：10.3760/cma.j.cn114452-20201202-00870
收稿日期2020-12-02本文編輯唐棟引用本文：中國研究型醫院學會血栓與止血專委會.活化部分凝血活酶時間延長混合血漿糾正試驗操作流程及結果解讀中國專家共識[J].中華檢驗醫學雜志,2021,44(8):690-697.DOI:10.3760/cma.j.cn114452-20201202-00870.·690·fmx_T3RoZXJNaXJyb3Jz中華檢驗醫學雜志2021年8月第44卷第8期ChinJLabMed,August2021,Vol.44,No.8了其應用的普及性。
中國研究型醫院學會血栓與止血專委會組織出凝血領域專家總結相關實踐經驗并參考國內外文獻就該試驗的啟動時機、操作流程、結果解讀、注意事項及報告模式共同編寫本共識，以推進APTT糾正試驗的標準化，供出凝血領域的醫生、檢驗醫師/技師等相關從業人員在處理APTT單獨延長的患者時參考。
一、混合血漿糾正試驗混合血漿糾正試驗是當PP凝固時間不明原因延長時，將PP與NPP按照一定比例混合后，重新檢測凝固時間的篩選試驗。一般來說，當所有凝血因子活性水平在50%及以上時，即可確保APTT維持在參考范圍內（不同APTT試劑對于凝血因子缺乏敏感性有差異，參考范圍不同，建議先進行相關驗證）。因此當缺乏一種或多種內源性凝血因子的PP與NPP（理論上所有凝血因子活性在100%左右）按1∶1的比例混合后，理論上混合血漿中凝血因子活性均應≥50%，APTT檢測結果可糾正至參考范圍內。而當PP存在凝血抑制物，如抗凝藥物、凝血因子抑制物、抗磷脂抗體等時，混合后APTT不能糾正至參考范圍內［1?5］。混合血漿糾正試驗的目的即是初步判斷延長的血漿凝固時間是由于缺乏凝血因子還是存在凝血抑制物所致，指導進一步確診凝血試驗的選擇［3，5?7］。混合血漿糾正試驗主要應用于APTT，當然也可應用于凝血酶原時間（prothrombintime，PT）及凝血酶時間（thrombintime，TT）。
二、啟動APTT糾正試驗的時機APTT不明原因明顯超出正常對照時即可考慮啟動APTT糾正試驗，建議同時結合患者臨床表現及臨床的需求來確定。在已知患者接受抗凝治療的情況下，APTT糾正試驗結果是可預測的，然而，當患者疑似正在服用抗凝藥，但具體的治療方案尚不清楚時，APTT糾正試驗可能會成為鑒別診斷策略的一部分［8］，以識別應優先啟動哪些后續試驗。建議1APTT結果不明原因超出正常對照至少5s，患者有相關癥狀、體征或臨床醫生需要進一步了解APTT延長的原因時，可啟動APTT糾正試驗。
三、APTT糾正試驗方法（一）NPP的制備與保存1.建議優先使用商品化正常血漿用于APTT糾正試驗，商品化正常血漿的使用和保存應按照制造商說明書進行操作。
2.若無法獲得商品化正常血漿，可選擇至少20份（男女比例1︰1）常規凝血試驗均正常的血漿混合制備（理想凝血因子水平應在80%~120%之間）。應避免選擇感染、腫瘤、創傷、術后、妊娠、新生兒、肝炎、自身免疫性疾病等人群標本。個體標本性狀要求無溶血、凝塊、黃疸和脂血等，從每名供者標本中采集足夠的血漿以達到最終所需的NPP量［9］。理想的NPP包括：（1）至少20份常規凝血試驗均正常的血漿混合制備，以便使得每種凝血因子水平接近100%；（2）所有單個血漿標本的血小板計數應<10×109/L；（3）NPP中不含LA［8］。3.將源自每名供者的等體積血漿（建議等體積）合并到同一容器中，混合后再次離心（離心力1500×g，時間15min）。最好每次做APTT糾正試驗前新鮮制備，也可分裝至凍存管中凍存（至少-20℃），使用時將凍存管取出后在37℃水浴中約5~10min或至完全融化，并輕輕顛倒混勻后進行試驗，禁止反復凍融使用。應避免在37℃孵育時間不足或過長，否則可能會因形成冷沉淀或熱失活而導致凝血因子活性的損失。復溶后應重新檢測APTT，APTT需在正常參考范圍內才可進行糾正試驗。4.自制NPP如需凍存時，應放置于非自動除霜冰箱［9］，-20℃條件下僅能放置2周，-70℃條件下可放置6個月，而-80℃深低溫冰箱保存則可維持NPP的凝血性質等同于新鮮血漿，保證凝血因子、抗凝物質的活性，可至少穩定8個月［10?12］。保存溫度越低，凝血因子的促凝活性保持時間也越長。（二）APTT糾正試驗的操作方法完整的APTT糾正試驗包括對混合血漿的即刻測定和孵育后測定兩個步驟（圖1）。混合比例通常采用PP和NPP進行1︰1混合，對于低滴度的抑制物可考慮使用4︰1混合的APTT糾正試驗。1.即刻APTT糾正試驗：（1）檢測PP得到APTT1；（2）檢測NPP得到APTT2；（3）將PP和NPP1︰1混合后即刻檢測得出APTT3。2.孵育APTT糾正試驗：（1）將PP、NPP、PP和NPP1∶1混合血漿的容器封口，置于37℃水浴箱孵育2h。水浴時間的控制非常重要，水浴超過2h，有提高假陽性的風險［13］。（2）待準確孵育2h后，分別即刻檢測孵育后的PP、NPP和1︰1混合血漿得到APTT4、APTT5、APTT6，同時將孵育后的PP和NPP以1︰1混合后即刻檢測得到APTT7。建議2可根據病情需要、實驗室具體情況選·691·fmx_T3RoZXJNaXJyb3Jz中華檢驗醫學雜志2021年8月第44卷第8期ChinJLabMed,August2021,Vol.44,No.8擇相應的試驗；所有混合后血漿檢測APTT均應即刻進行，排除因放置時間過久導致的試驗誤差。
四、APTT糾正試驗結果判斷及分析（一）APTT糾正試驗結果判斷完整的APTT糾正試驗結果解釋：（1）APTT3、APTT6均糾正提示凝血因子缺乏，不存在抑制物；（2）APTT3糾正、APTT6延長超過相應的臨界值，提示存在抑制物且為時間和溫度依賴性；（3）APTT3、APTT6均不糾正、APTT6比APTT7延長不超過相應的臨界值，提示存在抑制物，但抑制作用不存在時間和溫度依賴性；若APTT6比APTT7延長超過相應的臨界值，則抑制作用有時間和溫度依賴性；（4）APTT4、APTT5、APTT7分別作為APTT1、APTT2、APTT3的平行對照，以便于對實驗條件進行監控。當后者相比前者明顯延長時，則提示實驗過程中有不穩定因素，如孵育溫度超過可接受范圍或者存在pH值的明顯變化，那么有理由認為該次試驗的結果不可信，需要重新進行孵育試驗。（二）常用的APTT糾正試驗結果判斷方法1.即刻APTT糾正試驗：文獻報道用于將APTT糾正試驗解釋為“糾正”（凝血因子缺乏）或“未糾正”（凝血抑制物）［2?3，8，14］的常用方法有4種。（1）正常參考范圍/正常參考區間方法：將檢測結果與正常參考范圍（normalreferencerange，NRR）或正常參考區間（normalreferenceinterval，NRI）進行比較。臨床與實驗室標準化協會（ClinicalandLaboratoryStandardsInstitute，CLSI）指南［15］等建議結果在NRR/NRI范圍即為“糾正”［2，15］。該方法主要優點是易于應用和驗證，并且不需要制定其他替代的驗證方法和臨界值；主要缺陷是如果“異常”患者APTT試驗結果剛好位于NRR/NRI上限，可能的結果是無論患者血漿中是否存在抑制物，APTT糾正試驗結果都在NNR/NRI范圍內，此時APTT糾正試驗表現出來的“糾正”可能僅僅是由于抑制物的稀釋造成［1?2，16］。（2）循環抗凝物指數（indexofcirculationanticoagulant，ICA）方法：ICA方法也稱為“羅斯納指數”（Rosnerindex，RI）方法，以該方法的倡導者命名，最初是為LA研究而開發的。RI的計算公式為：RI=［（APTT3?APTT2）/APTT1］×100%，通常臨界值范圍為10%~15%［8］。建議3即刻糾正結果的RI臨界值范圍為10%~15%，低于10%提示因子缺乏，高于15%提示存在凝血抑制物，10%~15%為臨界值（灰區）。（3）百分比糾正法：也稱為“Chang”法［17］，以該方法的倡導者命名。百分比糾正法的公式為：%糾正=［（APTT1?APTT3）（/APTT1?APTT2）］×100%，關于臨界值的文獻報道略有差異［8，17?18］。（4）其他方法：①超過正常混合血漿5s以內（或延長<15%）為“糾正”；超過正常混合血漿5s以上（或延長>15%）為不糾正［19］。②文獻［11，20?21］建議將健康人群凝血時間的第99個百分位數設置為糾正與否的臨界值，并且應該由本地試劑和凝血儀組合確定。建議4以上所有方法存均不能100%區分凝血因子缺乏與凝血抑制物，如需明確診斷尚需結合相應的確認試驗進行綜合的判斷，且宜建立本地實驗室的臨界值并定期驗證。2.孵育APTT糾正試驗（1）APTT6是否糾正的判斷方法如下，請根據自身需求選擇與即刻糾正試驗對應的同類型判斷方法。①正常參考范圍/正常參考區間方法：將檢測結果與NRR或NRI進行比較。CLSI指南［15］等建議結果在NRR/NRI范圍即為“糾正”［2］。②ICA方法：孵育2h后RI（RI2h）的計算公式為：RI2h=［（APTT6?APTT5）/APTT4］×100%。③百分比糾正法：百分比糾正法的公式為：%糾正=［（APTT4?APTT6）（/APTT4?APTT5）］×100%。④超過正常混合血漿5s以內（或延長<15%）為“糾正”；超過正常混合血漿5s以上（或延長>15%）為不糾正［19］。⑤文獻建議［11，20?21］將健康人群凝血時間的第99個百分位數設置為糾正與否的臨界值，并且應該由本地試劑和凝血儀組合確定。（2）“時間依賴差”的判斷方法如下：①將“時間依賴差”定義為“Δ=APTT6?APTT7”，通常該差值Δ>3s則提示存在時間和溫度依賴性抑制物（如FⅧ抑注：PP為患者血漿，NPP為正常混合血漿圖1APTT糾正試驗操作示意圖·692·fmx_T3RoZXJNaXJyb3Jz中華檢驗醫學雜志2021年8月第44卷第8期ChinJLabMed,August2021,Vol.44,No.8制物）［22?23］。②若APTT6比APTT7延長超過10%~15%，則提示存在時間和溫度依賴性抑制物［19］。如需明確是否有FⅧ抑制物，應結合凝血因子活性和凝血因子抑制物檢測結果綜合分析。建議5應建立本地實驗室的臨界值并定期驗證。（三）APTT糾正試驗結果分析1.APTT糾正試驗結果分析與意義：通過以上方法進行APTT糾正試驗結果判定后，可在檢驗報告單中做相應的解釋。根據CLSI?H47A2［24］，在常用的APTT糾正試驗方法中，任一解釋為“糾正”的結果均可以算作“糾正”。APTT糾正試驗結果分析與意義見圖2。2.臨床上導致APTT延長的原因：主要見于凝血因子缺乏、凝血因子抑制物、LA以及某些抗凝藥物的干擾等，可以聯合PT、TT試驗和確認試驗明確診斷，詳見表1。五、APTT糾正試驗操作注意事項與局限性1.檢驗前影響因素：在做APTT糾正試驗之前，應排除檢驗前因素對檢驗結果的影響，如肝素污染、抗維生素K治療、凝血酶抑制劑或溶栓劑的存在等［1，24］。由于不同APTT試劑對凝血因子缺乏、LA和其他抑制物的敏感性不同，所以了解本地實驗室試劑性能有助于結果解釋。
2.關于混合比例：APTT糾正試驗待測血漿和NPP的混合比例最典型的是1︰1，可以使用不同的方法來識別糾正與否，為絕大多數臨床病例提供有效的鑒別，并可以作為LA診斷策略的一部分［15，25?28］，但沒有一種方法能夠完全正確地將凝血因子缺乏與抑制物進行鑒別［8］。在實際檢驗過程中可選擇其他比例進行混合，如4︰1及1︰4的混合比例，在某些病例中，4︰1比1︰1混合對于抑制物具有更高的敏感性和特異性，會使結果更清晰。使用4∶1混合標本的百分比糾正法公式［17，29］，可有效地鑒別LA和凝血因子缺乏的標本［8］。3.選擇Rosner指數判斷是否糾正的優點：目前RI方法和百分比糾正法是研究得最好、應用最廣泛的方法。選擇RI判斷是否糾正反映患者、對照及混合APTT的相對關系更為合理，當正常混合血漿制備不當（對照APTT偏高或偏低）或多重凝血因子缺乏（患者APTT過高）時，固定閾值（如NRR/NRI等方法）的判斷準確度均不及RI。APTT試劑更換品牌或批號時，固定閾值可能需要重新驗證或確定。RI方法和百分比糾正法具有互補性，有助于減少LA假陽性或假陰性的發生［30］。研究［14］表明，確定抑制物（通常是LA）存在的RI臨界值為11%或15%。Kershaw和Orellana建議［20，31］，臨界值11%更適合于當前APTT試劑以及全自動分析儀。APTT延長，PT正常懷疑凝血因子缺乏或抑制物（因子抑制物或LA）APTT糾正APTT不糾正FⅧ/FⅨ/FⅪ/FⅫ/PK/HMWK缺乏FⅧ/FⅨ/FⅪ/FⅫ活性檢測時間和溫度依賴性抑制物（FⅧ抑制物最常見）非時間和溫度依賴性抑制物FⅧ/FⅨ/FⅪ/FⅫ活性檢測活性下降的凝血因子對應的抑制物檢測凝血因子抑制物或LALA測定LA陰性LA陽性排除肝素等藥物污染復查確認PP與NPP1:1混合及37℃孵育2h注：PP為患者血漿，NPP為正常混合血漿，LA為狼瘡抗凝物，PK為激肽釋放酶原，HMWK為高分子量激肽原圖2APTT糾正試驗結果與臨床意義·693·fmx_T3RoZXJNaXJyb3Jz中華檢驗醫學雜志2021年8月第44卷第8期ChinJLabMed,August2021,Vol.44,No.84.關于LA：如果LA滴度較弱，APTT糾正試驗稀釋了LA的滴度，則很難區別低滴度的LA標本與LA陰性標本，特別是使用低LA敏感性的試劑［11］，可能導致假陰性結果［11，32?34］。此外，一些LA陽性的患者進行抗凝治療也很難鑒別出來［11，28，33］。APTT糾正試驗對于高滴度LA標本的檢測可能至關重要，應該在稀釋蝰蛇毒凝血時間試驗篩選試驗時間延長且LA比率“正常”的情況下應用［28，35］。研究［36］發現APTT糾正試驗中混合血漿的APTT較患者APTT延長而不是縮短，將PP與NPP1∶1混合后，稀釋蝰蛇毒凝血時間試驗和硅凝固時間的比率均顯著增加，這種通過正常血漿成分增加抑制物活性的現象稱為“狼瘡輔助因子”現象。該現象可能是凝血酶原導致的，也有學者認為是由β2?糖蛋白1（β2?GP1）所驅動［36?37］。所以，解釋糾正試驗的結果較為復雜，有時需要出凝血專家提供咨詢以解決疑難的臨床情況［38］。5.關于孵育試驗：如果APTT糾正試驗明確僅用于LA的篩查，患者無出血表現，則無需做孵育試驗。盡管FⅧ抑制物是時間和溫度依賴性的，但有研究發現抑制物滴度足夠高，可即刻完全中和混合血漿中的FⅧ活性［39］，而一些弱的FⅧ抑制物可能在即刻混合后糾正。不同文獻推薦的時間和溫度依賴性抑制物的臨界值差異較大，在3~10s之間［3，20，23］，應根據經驗建立本實驗室的臨界值并定期驗證。表1常見凝血功能異常檢驗結果分析診斷結果FⅧ、FⅨ、FⅪ、FⅫ、PK、HMWK等缺乏癥FⅦ缺乏FⅡ、FⅤ和/或FⅩ缺乏FⅧ、FⅨ、FⅪ和/或FⅫ抑制物FⅦ抑制物FⅡ、FⅤ和/或FⅩ抑制物LA彌散性血管內凝血（DIC）肝病VKA治療（開始用藥）/維生素K缺乏癥（低水平）VKA療法（用藥患者穩定）/維生素K缺乏（高水平）達比加群利伐沙班阿哌沙班普通肝素（治療水平）普通肝素（高于治療水平）PT試驗正常延長延長正常延長延長正常（可能延長）延長延長延長延長正常/延長延長正常/可能延長正常（除非試劑不含肝素中和劑，或肝素含量超過肝素中和劑）延長APTT試驗延長正常延長/正常延長正常延長延長延長延長正常或延長延長延長正常或延長正常/可能延長延長延長即刻混合血漿糾正試驗APTT糾正PT糾正PT和APTT均糾正APTT不糾正（大部分FⅧ抑制物對時間和溫度有依賴性，如果未混合孵育，APTT可能會糾正）PT不糾正PT和APTT均不糾正APTT不糾正PT和APTT均糾正PT和APTT均糾正PT和APTT均糾正PT和APTT均糾正APTT不糾正PT不糾正如果延長，PT/APTT不糾正，但應取決于判定糾正的方法（可糾正為NRI）APTT不糾正APTT不糾正，PT糾正/不糾正（如果將肝素稀釋到肝素中和劑范圍內可能會糾正，與患者肝素用量、試劑成分及含量相關）其他試驗/確認試驗（如果需要）FⅧ、FⅨ、FⅪ和FⅫ等活性檢測FⅦ活性檢測FⅡ、FⅤ和/或FⅩ活性檢測FⅧ、FⅨ、FⅪ和FⅫ（抑制物）試驗FⅦ（抑制物）試驗FⅡ、FⅤ和/或FⅩ（抑制物）試驗LA確認試驗D?二聚體、纖維蛋白原、血小板計數，可檢測其他凝血因子凝血因子測定，肝酶檢驗TT和FBG正常，FⅡ、FⅦ、FⅨ、FⅩ呈低水平TT正常，FⅡ、FⅦ、FⅨ、FⅩ呈低水平稀釋凝血酶時間（dTT）或質譜法用于確認，TT延長利伐沙班（抗?Ⅹa）檢測或質譜法可用于確認，TT正常阿哌沙班（抗?Ⅹa）測定法或質譜法可用于確認，TT正常肝素（抗?Ⅹa）試驗，TT延長常并TT混合血漿糾正試驗為“不糾正”，魚精蛋白、甲苯胺藍糾正試驗能糾正可提示，蘄蛇酶或爬蟲酶時間正常。但可能有與其他藥物如達比加群一起使用的情況肝素（抗?Ⅹa）試驗，TT延長常并TT混合血漿糾正試驗為“不糾正”，魚精蛋白、甲苯胺藍糾正試驗能糾正可提示，蘄蛇酶或爬蟲酶時間正常。但可能有與其他藥物如達比加群一起使用的情況注：PK為激肽釋放酶原，HMWK為高分子量激肽原，VKA為維生素K拮抗劑，NRI為正常參考區間·694·fmx_T3RoZXJNaXJyb3Jz中華檢驗醫學雜志2021年8月第44卷第8期ChinJLabMed,August2021,Vol.44,No.86.糾正試驗的自動化：傳統APTT糾正試驗是手工進行的，影響因素很多，實驗室檢驗人員的技能是關鍵因素。目前有出凝血分析儀可自動化進行即刻APTT糾正試驗和孵育試驗。與手工操作相比，自動化APTT糾正試驗的優勢在于可以減少由手工操作引起的技術差異，同時所需的血漿體積更小，并能夠縮短TAT，保證分析結果的可靠性［40］。7.復雜情況的結果分析：當同時存在多種抑制物或抑制物與凝血因子缺乏同時存在時，結果解釋將變得復雜，需結合患者病史、臨床表現和其他凝血檢查進行綜合分析。血栓與止血涵蓋醫療各專業領域，必要的備注說明和相關建議更能體現檢驗結果價值的增值，從而更好服務醫患。總之，APTT糾正試驗應在有出凝血專業知識的專家指導下和特定的臨床場景中進行操作，標準化的APTT糾正試驗結果對異常APTT的原因提供初始的評價，有助于指導進一步凝血因子或抑制物檢測試驗的選擇，從而節約成本和時間，使診斷效率最大化，最終保障檢測質量和患者安全［12］。執筆人：周洲（北京阜外醫院檢驗科），宋鑒清（中國醫科大學附屬第一醫院檢驗科）專家組成員（以姓氏筆畫為序）：馬汝飛（河南省人民醫院檢驗科），王賢（南京鼓樓醫院檢驗科），伍柏青（江西省人民醫院檢驗科），劉超男（四川大學華西醫院檢驗科），安倍瑩（吉林大學第一醫院檢驗科），許宏敏（天津市第三中心醫院檢驗科），孫海燕（上海交通大學醫學院附屬新華醫院檢驗科），壽瑋齡（中國醫學科學院北京協和醫院檢驗科），杜佳（武漢亞洲心臟病醫院檢驗科），李傳保（北京醫院檢驗科），李強（南方醫科大學南方醫院檢驗科），吳映娥（汕頭大學醫學院第一附屬醫院檢驗科），宋鑒清（中國醫科大學附屬第一醫院檢驗科），張文靜（北京大學第三醫院檢驗科），張洋（中國醫學科學院阜外醫院檢驗科），張福勇（廣西醫科大學第一附屬醫院檢驗科），張磊（西安交通大學第二附屬醫院檢驗科），陳要朋（解放軍聯勤保障部隊第九二三醫院檢驗科），陳振萍（首都醫科大學附屬北京兒童醫院檢驗科），周旭紅（廣州醫科大學附屬第二醫院檢驗科），周洲（中國醫學科學院阜外醫院檢驗科），周靜（四川大學華西醫院檢驗科），房云海（山東省血液中心山東省血友病診療中心檢驗科），趙學峰（南方醫科大學附屬南海醫院檢驗科），袁莉（西安交通大學第一附屬醫院檢驗科），唐寧（華中科技大學同濟醫學院附屬同濟醫院檢驗科），黃麗（南寧市第二人民醫院檢驗科），樓金吐（浙江大學醫學院附屬兒童醫院檢驗科），樊彩蘭（山西醫科大學第一醫院檢驗科），戴菁（上海交通大學醫學院附屬瑞金醫院檢驗科）利益沖突所有作者均聲明不存在利益沖突參考文獻[1]FavaloroE.Mixingstudiesforlupusanticoagulant:mostlyyes,sometimesno[J].ClinChemLabMed,2020,58(4):487‐491.DOI:10.1515/cclm‐2019‐1240.[2]BlennerhassettR,FavaloroE,PasalicL.Coagulationstudies:achievingtherightmixinalargelaboratorynetwork[J].Pathology,2019,51(7):718‐722.DOI:10.1016/j.pathol.2019.07.006.[3]ChenJ,PhillipsB,ChandlerWL.Evaluationofprothrombintimeandactivatedpartialthromboplastintimemixingstudiesusinganestimatedfactorcorrectionmethod[J].BloodCoagulFibrinolysis,2016,27(1):90‐96.DOI:10.1097/MBC.0000000000000375.[4]WinterWE,FlaxSD,HarrisNS.CoagulationTestingintheCoreLaboratory[J].LabMed,2017,48(4):295‐313.DOI:10.1093/labmed/lmx050.[5]MohammadE,ThachilJ.Mixingstudiesforabnormalcoagulationscreen‐thecurrenttrend[J].ClinChemLabMed,2017,55(3):e54‐e55.DOI:10.1515/cclm‐2016‐0595.[6]ChoiSH,RamballyS,ShenYM.MixingStudyforEvaluationofAbnormalCoagulationTesting[J].JAMA,2016,316(20):2146‐2147.DOI:10.1001/jama.2016.15749.[7]尚紅,王毓三,申子瑜.全國臨床檢驗操作規程(第4版)[M].人民衛生出版社,2015.[8]FavaloroEJ.Coagulationmixingstudies:Utility,algorithmicstrategiesandlimitationsforlupusanticoagulanttestingorfollowupofabnormalcoagulationtests[J].AmJHematol,2020,95(1):117‐128.DOI:10.1002/ajh.25669.[9]BakerP,PlattonS,GibsonC,etal.Guidelinesonthelaboratoryaspectsofassaysusedinhaemos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附件：APTT混合血漿糾正試驗檢驗報告單（模板）檢驗項目APTT1（患者）APTT2（正常混合血漿）APTT3（1︰1混合血漿即刻檢測）APTT4（患者孵育2h）APTT5（正常混合血漿孵育2h）APTT6（1∶1混合血漿孵育2h）APTT7（分別孵育2h后1︰1混合血漿）RosnerIndex（RI）孵育后延長時間（APTT6?APTT7）檢測結果參考范圍參考范圍參考范圍-----<10%：凝血因子缺乏（糾正）>15%：抑制物（不糾正）10%~15%：灰區≤3s，非時間和溫度依賴性抑制物>3s，時間和溫度依賴性抑制物結果判斷臨床診斷凝血因子缺乏時間和溫度依賴性抑制物非時間和溫度依賴性抑制物即刻試驗APTT3糾正APTT3糾正APTT3不糾正APTT3不糾正37℃孵育2h后試驗APTT6糾正APTT6不糾正APTT6不糾正，APTT6?APTT7>3s或APTT6?APTT3>臨界值APTT6不糾正，APTT6?APTT7≤3s或APTT6?APTT3≤臨界值
備注：1.RI結果位于灰區的標本，建議結合確認試驗判斷；2.APTT糾正試驗用于APTT升高原因的初步篩查，不能確保100%準確判斷，需結合臨床實際情況和相關確認試驗進行綜合分析
本文源自中華檢驗醫學雜志2021年8月第44卷第8期